淀粉水解糖的制備

一實驗目的：

（1）通過實驗，了解淀粉糊化及酶法制備淀粉糖漿的基本原理；

（2）掌握淀粉酶解法制備淀粉糖漿的實驗方法，

（3）熟悉淀粉水解產(chǎn)品的葡萄糖值測定方法。

一 實驗原理

發(fā)酵生產(chǎn)中，部分產(chǎn)生菌不能直接利用淀粉。也基本上不能利用糊精作為碳源。因此，當?shù)矸圩鳛樵�料時，必須現(xiàn)將淀粉水解成葡萄糖才能共發(fā)酵使用。在工業(yè)上將水解淀粉為葡萄糖的過程稱為淀粉的“糖化”。可用來制備淀粉水解糖的原料很多，主要有山芋，玉米，小麥，等含淀粉的原料。水解淀粉為葡萄糖的方法有三種，即酸解法，酶解法，酶酸法及雙酶法。本實驗采用的是雙酶法將淀粉水解成葡萄糖。首先利用的是α-淀粉酶將淀粉液化，轉化為糊精及低聚糖，使淀粉可溶性增加；接著利用糖化酶將糊精及低聚糖進一步水解，轉化為葡萄糖。

二 實驗器材

1，實驗材料

玉米粉 α—淀粉酶（2000u／g） 糖化酶（50000 u／g） 碘液（11g碘加22gkl，用蒸餾水定容至500ml）

2，儀器設備

恒溫水浴槽 真空泵 抽濾紙及布氏漏斗 比色卡、

四實驗方法：

淀粉在常溫下不溶于水，但當水溫至53℃以上時，淀粉的物理性能發(fā)生明顯變化。淀粉在高溫下溶脹、分裂形成均勻糊狀溶液的特性，稱為淀粉的糊化

淀粉糊化溫度必須達到一定程度，不同淀粉的糊化溫度不一樣，同一種淀粉，顆粒大小不一樣，糊化溫度也不一樣，顆粒大的先糊化，顆粒小的后糊化。

取50克淀粉置于400毫升燒杯中，加水200毫升，攪拌均勻，配成淀粉漿，用5% Na2CO3調(diào)節(jié)pH=6.2—6.3，加入1毫升5%CaCL2溶液，于90-95℃水浴上加熱，并不斷攪拌，淀粉漿由開始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克，不斷攪拌使其液化，并使溫度保持在70℃。然后將燒杯移至電爐加熱到95℃至沸，滅活10分鐘。過濾，濾液冷卻到55℃，加入糖化酶1克，調(diào)節(jié)pH=4.5，于60-

大學網(wǎng) 65℃恒溫水浴中糖化3-4小時，即為淀粉糖漿，若要濃漿，可進一步濃縮。

三 操作步驟

50克淀粉置于400毫升燒杯中，加水100毫升，攪拌均勻，配成淀粉漿，用5% Na2CO3調(diào)節(jié)pH=6.2—6.3，加入1毫升5%CaCL2溶液，于90-95℃水浴上加熱，并不斷攪拌，淀粉漿由開始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克，不斷攪拌使其液化，并使溫度保持在70℃。然后將燒杯移至電爐加熱到95℃至沸，

滅活10分鐘。過濾，濾液冷卻到55℃，加入糖化酶1克，調(diào)節(jié)pH=4.5，于60-65℃恒溫水浴中糖化3-4小時，即為淀粉糖漿，若要濃漿，可進一步濃縮。

1，液化：稱取50g玉米粉與燒杯中，加水至100ml，用純堿調(diào)節(jié)PH到6.2-6.4，再加入適量的氯化鈣。使鈣離子濃度達到0.01mol╱L，并加入一定量的α-淀粉酶（控制5-8u╱g淀粉） ，攪拌均勻后加熱至65℃，保溫1.5h’左右，用碘液檢驗，達到所需的液化程度后升溫到100℃，滅菌5-10min

2，碘液檢驗的方法：在潔凈的比色卡上滴入1-2滴碘液，再滴待檢的液化液，若反應液呈橙黃色或棕紅色即液化完全。

3，糖化：將上述的液化液冷卻至60℃，用10％檸檬酸調(diào)解PH至4.0-4.5按100u／g淀粉的量加入糖化酶，并于55-60％保溫糖化至糖化完全。糖化結束后升溫至100℃，滅酶5min。

4，糖化終點的判斷：在150×15試管中加入10-15ml無水乙醇，加糖化液1-2滴，搖勻后若無白色沉淀形成表明已達到糖化終點。 5，過濾：將糖化液趁熱用布氏漏斗進行抽濾即為水解糖液。

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