離子色譜法檢測液體乳和乳粉中的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽
檢測分析
食品研究與開發(fā)
2010年7月第31卷第7期
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離子色譜法檢測液體乳和乳粉中的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽
2*
成霈1，，劉鄰渭1，
（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西楊凌712100；2.西安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，陜西西安710065）
摘
要:探討離子色譜法檢測液體乳和乳粉中的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽。通過試驗(yàn)分析，確定樣品處理以及
離子色譜測定的條件。亞硝酸鹽、硝酸鹽、硫氰酸鹽的精密度依次為0.886％、1.704％、0.562％，液體乳加標(biāo)回收率依次為92.990％、98.116％、94.728％，乳粉加標(biāo)回收率依次為91.570％、94.892％、94.756％。關(guān)鍵詞：離子色譜；硝酸鹽；亞硝酸鹽；硫氰酸鹽；液體乳；乳大學(xué)網(wǎng)粉
DeterminationofNitrate,NitriteandThiocyanideinMilkandMilkPowderbyIonChromatography
2*
CHENGPei1，,LIULin-wei1，
（1.NorthwestA&FUniversity,Yangling712100，Shaanxi,China；2.Xi'anProductQualitySupervisionInspection
Institute,Xi'an710065,Shaanxi,China）
Abstract:Determinationofnitrate,nitriteandthiocyanideinmilkandmilkpowderbyionchromatographywasstudied.Samplepreparationandtheconditionofdeterminationofionchromatographyweredeterminedbyexperimentanalysis.Theprecisionofnitrate,nitriteandthiocyanidewere0.886％,1.704％,0.562％respectively.Recoveryofmilkwere92.990％,98.116％,94.728％respectively.Recoveryofmilkpowderwere91.570％,94.892％,94.756％respectively.
Keywords：ionchromatography；nitrate；nitrite；thiocyanide；milk；milkpowder隨著液體乳及乳制品在人們?nèi)粘Ｉ钪兴急戎卦絹碓酱�，其質(zhì)量安全問題也因此成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)。根據(jù)食品整治辦2009年印發(fā)的《關(guān)于印發(fā)全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則和方案的通知》，液體乳和乳粉中的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽超標(biāo)已經(jīng)成為目前影響乳制品質(zhì)量安全的突出問題。這3種危害人體健康的物質(zhì)進(jìn)入乳品的重要途徑包括：在奶牛的喂養(yǎng)過程中，如果飲水、飼料、飼料添加劑以及奶牛生長的環(huán)境中硝酸鹽、亞硝酸鹽的含量過高，則牛乳中硝酸鹽及亞硝酸鹽的含量就極可能超標(biāo)；由于硫氰酸鈉摻入原料乳或乳粉中后可有效的抑菌，不法奶戶不顧其對人體的危害作用而將其用于這些產(chǎn)品保鮮。因此，加強(qiáng)監(jiān)測力度、建立快速準(zhǔn)確的檢測方法成為當(dāng)務(wù)之急。根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)[1-2]，離子色譜法檢測液體乳和乳粉
作者簡介：成霈（1982—），男（漢），助理工程師，研究生，研究方向：食品工程。
*通訊作者：劉鄰渭，男，教授。
中的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽的速度快、效率高、結(jié)果準(zhǔn)確穩(wěn)定，因此，本文試用了這種方法并采用了與GB5009.33-2008《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測
[3]
定》有所不同的樣品提取和前處理方法，取得了良好
的測定效果。1
材料與方法
1）美國戴安ICS-1500離子色譜，配RFC淋洗液發(fā)生器，ASRS3004mm陰離子微膜自再生電化學(xué)抑制器，電導(dǎo)檢測器；
2）IonPacAS19（4mm×250mm）分析柱，IonPacAG19（4mm×50mm）保護(hù)柱；
3）淋洗液：EGCIIKOH；
4）MILLIPORE超濾杯，15mL，10000MWCO；5）OnGuardIIAg/H柱，使用前用15mL水活化；OnGuardIIRP柱，使用前依次用10mL甲醇，15mL水活化；
1.1儀器與試劑
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6）亞硝酸鹽、硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：中國計(jì)量科學(xué)研究院；硫氰酸鹽基準(zhǔn)物質(zhì)：北京化工廠；
7）甲醇、乙腈、三氯甲烷：色譜級；8）高速離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；
9）試驗(yàn)用水均為MILLIPOREMilli-Q超純水制備系統(tǒng)所制超純水，K＜0.5mS/m。1.2樣品處理1.2.1
液體乳樣品
取樣品10mL于50mL聚丙烯離心管內(nèi)，加入15mL乙腈，劇烈振搖后10000r/min離心5min，取上清液5mL加入超純水45mL，混勻倒入超濾杯，4000r/min離心10min（若離心所得溶液不足10mL可以適當(dāng)增加離心時(shí)間），移除超濾杯再加入15mL三氯甲烷，劇烈振搖后4000r/min離心5min，取上層清液過0.22μm水系針式過濾器，RP柱，Ag/H柱進(jìn)離子色譜測定。1.2.2
乳粉樣品
取樣5g于50mL聚丙烯離心管內(nèi)，加入10mL水溶解后再加入15mL乙腈，以下同1.2.1。1.2.3
標(biāo)準(zhǔn)溶液
取亞硝酸鹽、
硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液，硫氰酸鹽基準(zhǔn)物質(zhì)用超純水配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再稀釋成標(biāo)準(zhǔn)系列，見表1。
表13種陰離子標(biāo)準(zhǔn)系列濃度表
Table1Theconcentrationofthreenegativeion
mg/kg
陰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度1濃度2濃度3濃度4濃度5濃度6NO2-0.2000.1000.0400.0200.0080.0040.002NO
3
-5.0002.5001.0000.5000.2000.1000.050SCN-
1.000
0.500
0.200
0.100
0.040
0.020
0.010
1.3儀器條件
KOH淋洗液梯度淋洗，初始23mmol/L運(yùn)行12min,
然后在11min內(nèi)至78mmol/L再運(yùn)行5min后回到23mmol/L平衡2min，準(zhǔn)備下次進(jìn)樣。淋洗液流速1mL/min,進(jìn)樣體積100μL，柱溫30℃，抑制器電流174mA。2結(jié)果與分析
2.1
色譜質(zhì)量和干擾分析
按照上述儀器條件測定，硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖1，液體乳樣品色譜圖見圖2，乳粉樣品色譜圖見圖3。
比較這3張色譜圖可知，在所用的色譜條件下液體乳和乳粉中所含的各種主要離子的保留時(shí)間和硝酸
根離子、亞硝酸根離子及硫氰酸根離子的保留時(shí)間都不同，并且3張圖的基線都很平直。所以可以認(rèn)為，運(yùn)用本文選用的色譜條件測定液體乳和乳粉中硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽的含量時(shí)，樣品中的其他離子和本底不產(chǎn)生干擾。2.2
測定精度、線性范圍和檢出限
按照上述儀器條件測定硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰
酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成的標(biāo)準(zhǔn)系列，根據(jù)測定結(jié)果，以峰面積（S）對質(zhì)量濃度（C）進(jìn)行一元線性回歸分析，得到回歸方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍;以空白樣品加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)測定20次，按GB/T16631-2008《高效
液相色譜法通則》
[4]
計(jì)算最小檢測限，結(jié)果見表2。將表2中的最小檢測限和GB5009.33-2008《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定》相應(yīng)的檢出限（注
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表23種陰離子工作曲線線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍和檢
出限
Table2Theregressionequation,correlationcoefficient,linear
rangeandofdetectionlimitthreenegativeion陰離子NO2-NO
-3
表4說明：按照本文的方法，兩種樣品中3種離子測定時(shí)的加標(biāo)回收率都在91%～99%之間，符合常規(guī)分析的要求。3結(jié)論
本方法采用離子色譜法同時(shí)分析液體乳和乳粉中的`硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽，較GB5009.33-2008《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定》優(yōu)化了樣品制備和前處理步驟，降低了乳制品中蛋白質(zhì)、脂肪等大分子化合物帶來的基質(zhì)干擾，結(jié)果顯示：這種方法不但同時(shí)完成了3種物質(zhì)的定量測定，而且較國標(biāo)方法相對降低了亞硝酸鹽和硝酸鹽的檢測限，并且加標(biāo)回收率都達(dá)到常規(guī)分析的要求。所以，使用這種方法可以滿
[5]
，足現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB5408.1-1999《巴氏殺菌乳》[6]
GB5408.2-1999《滅菌乳》等的檢測要求。
回歸方程C=2.8752S-0.1309C=0.6594S-0.1020C=0.6326S-0.1594
相關(guān)系數(shù)0.999770.999500.99930
測定范圍/(mg/kg)0.002～0.1000.050～2.5000.010～0.500
最小檢測限/(mg/kg)
0.00120.00670.0033
SCN-
GB5009.33-2008《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定》中的離子色譜法中亞硝酸鹽和硝酸鹽的檢出限分別為0.4mg/kg和0.8mg/kg）相比可以看出，本文采用的方法具有相對很低的檢出限。2.3
測定重現(xiàn)性
選定一組混合標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)測定7次，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果見表3。
表33種陰離子精密度試驗(yàn)
Table3Theprecisionofthreenegativeion
陰離子NO2-NO3-SCN-質(zhì)量濃度/(mg/kg)0.020.500.10
保留時(shí)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差/%0.0450.0330.009
峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差/%0.8861.7040.562
參考文獻(xiàn)：
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研究所.GB/T16631-2008高效液相色譜法通則[S].中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局
表3說明：3種陰離子保留時(shí)間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%，符合GB5009.33-2008《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定》中相應(yīng)的精密度要求。2.4
測定準(zhǔn)確性
分別取液體乳、乳粉樣品加入一定量的硝酸鹽、亞硝酸鹽及硫氰酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法進(jìn)行處理、測定，結(jié)果見表4。
表43種陰離子加標(biāo)回收試驗(yàn)
Table4Therecoveryofthreenegativeion
樣品液體乳
陰離子NO2-NO3-SCN-NO2-NO3-SCN-本底值/(mg/kg)
n.a.n.a.0.8832n.a.n.a.0.6977
加標(biāo)量/(mg/kg)
1.02.52.51.02.52.5
測定值/(mg/kg)0.92992.45293.25140.91572.37233.0666
回收率/%92.99098.11694.72891.57094.89294.756
[5]黑龍江乳品工業(yè)研究所.GB5408.1-1999巴氏殺菌乳[S].國家質(zhì)
量技術(shù)監(jiān)督局
[6]黑龍江乳品工業(yè)研究所.GB5408.2-1999滅菌乳[S].國家質(zhì)量技
術(shù)監(jiān)督局
乳粉
注：n.a.表示低于最小檢測限。
收稿日期：2010-02-08
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