血清蛋白電泳和免疫固定電泳的臨床應(yīng)用

臨床實(shí)驗室檢查結(jié)果解讀

血清蛋白電泳和免疫固定電泳的臨床應(yīng)用

姜　　緋

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院檢驗科，沈陽�。保保埃埃埃矗�

中圖分類號：Ｒ８１４文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ

文章編號：１６７２－７１８５（２００９）０２－

００１４－０３

１　　正常血清蛋白電泳組分

正常血清經(jīng)電泳后可以很快分為白蛋白、α１－球蛋白、α２－球蛋白、β－球蛋白、γ－球蛋白５個區(qū)帶，每個區(qū)帶含有一種或多種蛋白成分，各區(qū)帶的變化與疾病間有密切關(guān)系。利用血清蛋白電泳譜帶光密度測定各區(qū)帶濃度的百分比（％）。也可將各區(qū)帶百分濃度與血清總蛋白濃度乘以絕對濃度（　Ｌ）表示。參考值見表１。１．１　　白蛋白　　由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，血漿白蛋白濃度可以受飲食中蛋白質(zhì)攝入的影響，在一定程度上可以作為個體營養(yǎng)狀態(tài)的評價指標(biāo)，有較廣泛的載體功能。血漿白蛋白增高較少見，在嚴(yán)重失水時，　對監(jiān)測血濃縮有診斷意義。低白蛋白血癥，可見于以下幾種原因：①白蛋白合成減低。常見于急性或慢性肝病。②由于營養(yǎng)不良或吸收不良。③遺傳性缺陷無白蛋白血癥。④組織損傷（外科手術(shù)或創(chuàng)傷）或炎癥（感染性疾病）引起的白蛋白分解增加。⑤白蛋白異常丟失，如腎病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、潰瘍性結(jié)腸炎、腫瘤、燒傷所致滲出性皮炎等。⑥白蛋白分布異常。如門脈高壓時，大量蛋白質(zhì)從血管內(nèi)滲

入腹腔。

１．２　　α１－區(qū)帶球蛋白　�、佴粒保�抗胰蛋白酶是具有蛋白酶抑制作用的一種急性時相反應(yīng)蛋白，低血漿α１－抗胰蛋白酶可以發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征，先天α１－抗胰蛋白酶缺陷易導(dǎo)致肺氣腫和肝硬化。②α１－酸性糖蛋白，早期稱之為乳清類黏蛋白，是主要的急性時相反應(yīng)蛋白，　在急性炎癥時增高，　在風(fēng)濕病、惡性腫瘤及心肌梗死患者亦常增高，在營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝損害等情況下降低。③α

１

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－７１８５．２００９．

０２．００９

血清蛋白質(zhì)是一類種類繁多、組成復(fù)雜、功能廣泛的化合物，在病理和生理情況下，各種血清蛋白的濃度和組分間的比例可發(fā)生改變。新鮮血清經(jīng)電泳可精確并定量顯示生理或不同病理狀況下血清蛋白成分的特定變化。血清蛋白電泳技術(shù)可以直觀地判斷血清蛋白的分布全貌，對肝硬化、腎病、各種肝病、多發(fā)性骨髓瘤等均有診斷價值，尤其對肝硬化、多發(fā)性骨髓瘤的診斷價值更大。免疫固定電泳還能對多發(fā)性骨髓瘤準(zhǔn)確進(jìn)行免疫學(xué)分型。在全自動電泳儀問世以前，由于存在多種客觀因素，不能對血清蛋白進(jìn)行快速分析，影響因素也較多，在臨床應(yīng)用上就受到限制。隨著技術(shù)的發(fā)展，血清蛋白電泳在臨床上得以廣泛運(yùn)用，能快速、準(zhǔn)確地對血清蛋白進(jìn)行分析，并且圖譜清晰；結(jié)合免疫固定電泳，可準(zhǔn)確地對多發(fā)性骨髓凈瘤進(jìn)行免疫學(xué)分型。

－脂蛋白，在嚴(yán)重肝病如肝硬化時明

顯降低，妊娠及高雌激素血癥時可輕度增加。④甲胎蛋白主要在胎兒肝臟中合成，可在大約８０％的成人肝癌患者血清中升高，在生殖細(xì)胞腫瘤出現(xiàn)甲胎蛋白的陽性率為５０％，在其他腸胃管腫瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者亦可出現(xiàn)不同程度的升高

１．３　　α２－區(qū)帶球蛋白　　①結(jié)合珠蛋白在血漿中與游離的血紅蛋白結(jié)合，是一種急性時相反應(yīng)蛋白，急性時相反應(yīng)中血漿結(jié)合珠蛋白增加，當(dāng)燒傷和腎病綜合征引起大量白蛋白丟失的情況下亦可見增加。血管內(nèi)溶血和溶血性貧血、輸血反應(yīng)、瘧疾時結(jié)合珠蛋白含量明顯下降。此外，嚴(yán)重肝病患者結(jié)合珠蛋白的合成降低。②α２－巨球蛋白是血漿中分子量最大的蛋白質(zhì)，是由肝細(xì)胞與單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中合成，但當(dāng)與蛋白水解酶結(jié)合為復(fù)合物后，其清除加速。在低蛋白血癥時，其含量可增高，可能系一種代償機(jī)制，以保持

表１　正常血清蛋白電泳組分及其參考值

項目名稱白蛋白（電泳）α１－球蛋白α２－球蛋白β－球蛋白γ－球蛋白

英文縮寫ＡＬＢα１α２βγ

參考值（％）

５５～７５１．０～３．０５．０～９．０６．０～１２．０１０．０～１９．０

ZHONGGUO SHIYONG XIANGCUN YISHENG ZAZHI　�。玻埃埃�，１６（２）

血漿膠體滲透壓。妊娠期及口服避孕藥時血濃度增高，機(jī)制不明。③銅藍(lán)蛋白是一種含銅的α２－糖蛋白，也屬于一種急性時相反應(yīng)蛋白。在感染、創(chuàng)傷和腫瘤時，血漿含量增加，在營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝病及腎病綜合征時，其含量往往下降。妊娠期、口服避孕藥時，其含量有明顯增加。該蛋白有助于協(xié)助Ｗｉｌｓｏｎ病的診斷，即患者血漿銅蘭蛋白的含量明顯下降，而伴有血漿可透析的銅含量增加。

１．４　　β１－區(qū)帶蛋白　�、俎D(zhuǎn)鐵蛋白是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì)，血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白質(zhì)的水平可用于貧血的診斷和對治療的監(jiān)測。在缺鐵性的低血色素貧血時轉(zhuǎn)鐵蛋白水平增高。但其鐵的飽和度很低，相反，如果貧血是由于紅細(xì)胞對鐵的利用障礙，　則血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白正�；虻拖�，但鐵的飽和度增高。轉(zhuǎn)鐵蛋白在急性時相反應(yīng)中往往降低。因此，在炎癥、惡性病變時，常隨著白蛋白和前白蛋白同時下降；在慢性肝病及營養(yǎng)不良時亦下降，可作為評價營養(yǎng)狀態(tài)的一項指標(biāo)。妊娠及口服避孕藥或雌激素注射可使血漿轉(zhuǎn)鐵蛋白升高。②血紅素結(jié)合蛋白和游離血紅素有特異結(jié)合能力，可配合結(jié)合珠蛋白對血紅蛋白進(jìn)行處理。當(dāng)廣泛溶血時，血漿結(jié)合珠蛋白耗竭，循環(huán)中游離的血紅蛋白可降解為珠蛋白和血紅素兩部分，血紅素結(jié)合蛋白可與血紅素可逆性結(jié)合，在血循環(huán)中反復(fù)利用，這是機(jī)體有效地保存鐵的又一種方式。③β－脂蛋白負(fù)責(zé)主要功能脂類的運(yùn)輸。腎病或某些腸道疾病常可導(dǎo)致血漿蛋白丟失，由于肝細(xì)胞補(bǔ)償性的合成增加，β－脂蛋白可有增加。④Ｃ４是補(bǔ)體成分，屬急性時相反應(yīng)蛋白之一，　在炎癥、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染、腫瘤等情況下可見升高。

１．５　　β２－區(qū)帶蛋白　　①纖維蛋白

原：纖維蛋白的前身參與凝血。也是急性時相蛋白之一，當(dāng)機(jī)體處于炎癥或損傷狀態(tài)時，纖維蛋白原可見增加。②Ｃ３：補(bǔ)體系統(tǒng)，屬急性時相蛋白，在急性炎癥時可見上升；肝臟疾病時，由于肝細(xì)胞損害而偏低。③β２－微球蛋白在腎功能衰竭、炎癥及腫瘤時，血漿中濃度可升高。在白血病和淋巴瘤有神經(jīng)系統(tǒng)浸潤時，腦脊液中β２－微球蛋白可增高。１．６　γ區(qū)帶球蛋白　�、伲桑纾牵嚎贵w組分之一。肝硬化時ＩｇＧ彌散性增高，風(fēng)濕�。桑纾强梢娫龈�，而選擇性蛋白質(zhì)丟失和妊娠期及高雌激素血癥時ＩｇＧ略有降低。②ＩｇＡ：抗體組分之一，肝硬化和風(fēng)濕病時ＩｇＡ　明顯升高。③ＩｇＭ：抗體組分之一，選擇性蛋白丟失時ＩｇＭ增加，風(fēng)濕病及肝病初期ＩｇＡ可增加。④Ｃ－反應(yīng)蛋白：是急性時相反應(yīng)蛋白的敏感指標(biāo)，血漿中Ｃ－反應(yīng)蛋白濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術(shù)、腫瘤浸潤時迅速顯著增高，可達(dá)正常水平的２　０００倍。結(jié)合臨床病史，有助于隨訪病程。特別在炎癥過程中，隨訪風(fēng)濕病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病等。

升，表現(xiàn)為肝硬化所特有的慢性肝損害型蛋白電泳圖譜。隨著肝病的發(fā)展，血清中白蛋白的含量逐漸下降，γ－球蛋白的含量逐漸上升。肝硬化患者由于ＩｇＡ的增加，γ－球蛋白明顯增加并出現(xiàn)快γ球蛋白，使得β和γ－球蛋白連接在一起而不易分開，可見β－γ橋，是肝硬化血清蛋白電泳圖譜的的特征。２．２　　腎病綜合征　　血清蛋白泳圖型主要特征是白蛋白明顯降低，α１－球蛋白輕度增加，α２－球蛋白明顯增加，γ－球蛋白降低。由于白蛋白等小分子蛋白選擇性地漏出，α２－球蛋白及ＩｇＭ脂蛋白等大分子殘留在血中，致使白蛋白比例減少，α２－球蛋白明顯增加，β及γ－球蛋白亦可下降。慢性腎炎急性期α－球蛋白可增高，有時合并γ－球蛋白輕度增高，白蛋白／球蛋白比值（Ａ／Ｇ）明顯下降，可出現(xiàn)嚴(yán)重倒置　。

２．３　　炎癥　　由于白蛋白是負(fù)急性時相蛋白，在炎癥或應(yīng)激反應(yīng)時減低；同時由于蛋白分解亢進(jìn)，而α１－抗胰蛋白酶、α１－酸性糖蛋白、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白等急性時相反應(yīng)蛋白顯著增加，故電泳圖譜的顯著特征為白蛋白降低，α１－　、α２－球蛋白增加，β－球蛋白、γ－球蛋白無變化；當(dāng)炎癥轉(zhuǎn)為慢性時明顯升高。２．４　　多發(fā)性骨髓瘤（單克隆免疫球蛋白血癥）　　患者血清蛋白電泳分析發(fā)生漿細(xì)胞病時，異常漿細(xì)胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈和重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結(jié)構(gòu)單一的Ｍ蛋白在蛋白電泳時呈現(xiàn)出一個色澤深染的區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ區(qū)或β區(qū)，偶見于α區(qū)。此類情況可以進(jìn)一步應(yīng)用免疫固定電泳加以鑒別。

２　　異常血清蛋白電泳圖譜的

分型及其特征

慢性肝炎、肝硬化α２－球蛋白顯著下降，可能是由于肝損傷導(dǎo)致結(jié)合珠蛋白合成降低所致，而肝癌α２－球蛋白顯著上升，在與惡性腫瘤時細(xì)胞分裂增加，產(chǎn)生的多種“急性相反應(yīng)物質(zhì)”蛋白群集中于α２－球蛋白區(qū)有關(guān)，表現(xiàn)為應(yīng)激反應(yīng)型蛋白電泳圖譜分型，有助于良、惡性肝病的鑒別診斷。慢性肝炎轉(zhuǎn)化為肝硬化后白蛋白顯著下降，γ－球http://www.ishadingyu.com/news/558C59812CC6237F.html蛋白顯著上升，表現(xiàn)為肝硬化所特有的慢性肝損害型蛋白電泳圖譜。２．１　　慢性肝損害型患者血清電泳分析　　慢性肝炎轉(zhuǎn)化為肝硬化后白蛋白顯著下降，γ－球蛋白顯著上

３　　免疫固定電泳

免疫固定電泳技術(shù)可用于鑒別單克隆丙種球蛋白血癥和多克隆丙

中國實(shí)用鄉(xiāng)村醫(yī)生雜志 ２００９年第２期（第１６

種球蛋白血癥，也是目前最廣泛地用于鑒別Ｍ　蛋白的方法之一３．１　　相關(guān)疾病　　單克隆免疫增殖性疾病是一種源于前Ｂ淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆增殖所產(chǎn)生的一種氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白（又稱Ｍ蛋白），Ｍ蛋白大致可分為惡性與良性（意義不明）兩大類。

良性單克隆丙種球蛋白病系指正常人血清中出現(xiàn)Ｍ蛋白，而不伴有漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。本病一般無癥狀，可發(fā)生于５０歲以上（５％�。┗颍罚皻q以上（８％�。┑恼�常人群中，與惡性病不同，本病的血清Ｍ蛋白水平一般不太高，不超過０．２　ｇ／Ｌ，臨床上不伴有淋巴細(xì)胞惡性增生的癥狀，不出現(xiàn)骨損害和貧血等。骨髓中漿細(xì)胞數(shù)不超過骨髓細(xì)胞總數(shù)的１０％，且形態(tài)正常。僅少數(shù)患者有可能轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒圆　?/p>

惡性漿細(xì)胞病系漿細(xì)胞或產(chǎn)生免疫球蛋白（Ｉｇ）的淋巴樣漿細(xì)胞和Ｂ淋巴細(xì)胞過渡增殖引起的一組疾病，以血清或尿中出現(xiàn)過量的單克�。桑缁蜉p鏈或重鏈片斷為其臨床特征。多發(fā)性骨髓瘤（ＭＭ）　、原發(fā)性巨

球蛋白血癥均屬于惡性漿細(xì)胞病。此病好發(fā)于老年人，男性多于女性。腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生均一的單克隆免疫球蛋白，而正常免疫球蛋白的分泌受到明顯抑制而顯著減少。

３．２　　臨床應(yīng)用　　惡性漿細(xì)胞病的Ｉｇ顯著增高，平均在正常上限的２倍以上（�。桑纾切投喟l(fā)性骨髓瘤）　、４倍以上（�。桑纾列投喟l(fā)性骨髓瘤）　、１０倍以上（原發(fā)性巨球蛋白血癥）　，均超過惡性漿細(xì)胞病Ｍ－蛋白的診斷標(biāo)準(zhǔn)，即ＩｇＧ型多發(fā)性骨髓瘤�。桑纾恰。尽。常担纾�Ｌ，�。桑纾列投喟l(fā)骨髓瘤ＩｇＡ　＞�。玻啊。纾�Ｌ，原發(fā)性巨球蛋白血癥ＩｇＭ�。尽。常啊。纾�Ｌ。而非惡性漿細(xì)胞病的ＩｇＧ增高患者、ＩｇＡ增高患者、ＩｇＭ增高患者相應(yīng)免疫球蛋白含量均小于正常上限的２倍。惡性漿細(xì)胞病的另兩種Ｉｇ顯著降低，平均濃度均在參考范圍下限以內(nèi)，有些病例甚至檢測不到，含量為零，分泌明顯受到抑制。而非漿細(xì)胞病另兩種Ｉｇ均在正常范圍以內(nèi)，分泌均未受到抑制。也就是說，盡管個別惡性漿細(xì)胞病中Ｍ－蛋白的含量有未超過診斷標(biāo)準(zhǔn)的病例，但是另兩種Ｉｇ受抑制卻是肯定的。正常Ｉｇ由多株（克隆）漿細(xì)胞產(chǎn)生，所以血清蛋白電

泳γ區(qū)顯示不均一的較寬的波形，而惡性漿細(xì)胞病血清蛋白電泳區(qū)帶除Ｍ�。�　蛋白帶顯示高窄集中外，γ區(qū)其余部分染色極淺，幾乎無帶。從另一方面說明正常Ｉｇ分泌明顯減少。通過以上分析，我們對惡性漿細(xì)胞病Ｍ－蛋白的判定有了深入的了解。在給病人做化驗檢查時，若患者血清總蛋白含量平均在９０�。纾�Ｌ、球蛋白含量平均在５９�。纾�Ｌ以上，３種免疫球蛋白中的一種顯著增高并接近或超過惡性漿細(xì)胞�。停�蛋白的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且另兩種免疫球蛋白顯著減少并低于正常參考值下限，血清蛋白電泳出現(xiàn)密集高峰帶、γ區(qū)淡染，進(jìn)一步做免疫固定電泳，則可對Ｍ　－　蛋白作出明確診斷。

免疫固定電泳技術(shù)可用于鑒別單克隆丙種球蛋白血癥和多克隆丙種球蛋白血癥，也是目前最廣泛地用于鑒別Ｍ　蛋白的方法之一。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和進(jìn)步，電泳技術(shù)尤其是免疫電泳技術(shù)在生物學(xué)、分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)得到不斷完善，已成為臨床檢驗不可缺少的技術(shù)。

（收稿日期：２００８－１１－２０）

?臨床經(jīng)驗薈萃?

青霉素皮試液配制方法的一點(diǎn)補(bǔ)充

鄭維發(fā)

（湖北省公安縣甘廠鄉(xiāng)牧牛衛(wèi)生室，４３４３２３）

中圖分類號：Ｒ５６文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ

文章編號：１６７２－７１８５（２００９）０２－

００１６－０１

滴注，都會遇到各種規(guī)格的制劑。教科書中規(guī)定，皮內(nèi)注射０．１�。恚桃后w中含青霉素５０�。铡９P者經(jīng)反復(fù)觀察，作以下補(bǔ)充。

８０萬Ｕ／支青霉素Ｇ鈉加注射用水１．４�。恚�，稀釋為１．６�。恚�；１６０萬Ｕ／支青霉素Ｇ鈉加注射用水２．８�。恚�，稀釋為３．２�。恚�；４００萬Ｕ／支青霉素Ｇ鈉加注射用水７�。恚蹋�稀釋為８�。恚�。以上液體均含青霉素５０萬Ｕ／ｍＬ。用注射器抽取以上任何液體中的０．１�。恚�

（含青霉素５萬Ｕ），加注射用水０．９ｍＬ。去掉注射器中的液體０．９　ｍＬ，剩余０．１�。恚蹋ê�青霉素５�。埃埃啊。眨�，再加注射用水０．９　ｍＬ。再去掉注射器中的液體０．９�。恚�，剩余０．１　ｍＬ（含青霉素５００�。眨�，再加注射用水０．９�。恚獭Ｓ蒙鲜鲎詈蟮囊后w０．１�。恚蹋ê�青霉素５０�。眨�，可用于患者的皮內(nèi)過敏試驗，如結(jié)果為陰性，該支青霉素Ｇ鈉可用于該患者。

（收稿日期：２００８－１２－０２）

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－７１８５．２００９．

０２．０１０

在村衛(wèi)生室中，需要使用青霉素的患者較為零散。根據(jù)青霉素皮試液需新鮮配制的要求，可一人一配制。但無論是肌內(nèi)注射還是靜脈

ZHONGGUO SHIYONG XIANGCUN YISHENG ZAZHI　�。玻埃埃梗�１６（２）

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