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細(xì)胞培養(yǎng)皿
細(xì)胞培養(yǎng)皿【轉(zhuǎn)】
一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿等標(biāo)明 “Tissue Culture Treated”是什么意思？ 大部分動(dòng)物細(xì)胞需要貼附在一個(gè)固相界面上才能生長(zhǎng)。而只有親水的固相界面，細(xì)胞才能貼附。
最早的細(xì)胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的，不經(jīng)過(guò)特殊的處理，普通的細(xì)胞就可以貼附生長(zhǎng)。 聚苯乙烯透光性能好，具有較好的強(qiáng)度和易塑性，并且沒(méi)有毒性，成為一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板等一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材的首選材料（一般的磁帶和CD盒也是用聚苯乙烯制成的）。然而聚苯乙烯表面是憎水的，所以需要經(jīng)過(guò)表面的改性處理，變成親水后才能適用于細(xì)胞培養(yǎng)。
一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿等標(biāo)明“Tissue culture treated”，是表示該器皿經(jīng)過(guò)表面的改性處理，適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。而懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，就不一定需要這樣經(jīng)過(guò)特殊處理過(guò)的器皿。但經(jīng)過(guò)表面的改性處理后的細(xì)胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)中邊緣效應(yīng)和解決辦法
細(xì)胞培養(yǎng)中的邊緣效應(yīng)是指在使用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)
中，在周邊孔中的細(xì)胞會(huì)集中在孔的外側(cè)，如左圖所示（孔
內(nèi)白亮的為細(xì)胞集中的區(qū)域）。這種現(xiàn)象在實(shí)驗(yàn)中常用的
96孔板中十分明顯。
由于大多細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)受周?chē)佑|細(xì)胞的抑制，所以
邊緣效應(yīng)導(dǎo)致邊緣孔內(nèi)細(xì)胞平均生長(zhǎng)速度要比其他孔來(lái)得
慢，從而在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中引入系統(tǒng)誤差。在很多大規(guī)模藥物篩選實(shí)驗(yàn)中，人們甚至棄去周?chē)椎膶?shí)驗(yàn)結(jié)果。
邊緣效應(yīng)是由于在室溫下的培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱后，培養(yǎng)板上產(chǎn)生的溫度差影響細(xì)胞沉降引起的。所以解決邊緣效應(yīng)的一個(gè)簡(jiǎn)單有效的方法，就是在培養(yǎng)板內(nèi)分入細(xì)胞后，在室溫下放置1-2個(gè)小時(shí)，讓細(xì)胞在沒(méi)有溫細(xì)胞培養(yǎng)皿度差的情況下沉降，然后再轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱內(nèi)（1）。該方法至少適合CHO等在室溫下能貼壁的細(xì)胞。
1. BETINA KERSTIN LUNDHOLT, KURT M. SCUDDER, and LEN PAGLIARO, A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays. Journal of Biomolecular Screening 2003:566-570
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