少動鞘氨醇單胞菌ZX4兒茶酚2,3-雙加氧酶基因的克隆與表達(dá)

摘要： 應(yīng)用PCR方法克隆了少動鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的兒茶酚2,3-雙加氧酶基因(c23O-ZX4).核苷酸序列測定與分析表明,該基因片段全長924 bp且具有一個完整的閱讀框,編碼306個氨基酸殘基.該基因與已報(bào)道的來自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(編碼產(chǎn)物均為C23O)具有較高的核酸序列同源性,分別為94.37%和94.05%.通過Hind Ⅲ和Xho Ⅰ兩個限制性酶切位點(diǎn)將該基因連接到質(zhì)粒pET30(a)+上得到重組表達(dá)質(zhì)粒pET-S3,并在E. coli BL21進(jìn)行了表達(dá),得到了42.3 kD的融合蛋白.酶活測定發(fā)現(xiàn)該基因工程菌株的發(fā)酵產(chǎn)酶活力明顯高于出發(fā)菌株. 作 者： 周德平    吳淑杭    閔航    姜震方    ZHOU De-ping    WU Shu-hang    MIN Hang    JIANG Zhen-fang   作者單位： 周德平,吳淑杭,姜震方,ZHOU De-ping,WU Shu-hang,JIANG Zhen-fang(上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境科學(xué)研究所,上海,201106)

閔航,MIN Hang(浙江大學(xué)生命科學(xué)院,杭州,310029) 

期 刊： 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)  ISTICPKU   Journal： ACTA AGRICULTURAE SHANGHAI  年，卷(期)： 2007, 23(2)  分類號： X172  關(guān)鍵詞： 菲降解    少動鞘氨醇單胞菌    兒茶酚2,3-雙加氧酶基因   

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