Akt1與凋亡誘導因子AIF相互作用的研究

目的 確定Akt1與凋亡誘導因子AIF是否存在相互作用及其可能的作用方式.方法 從成人肝cDNA文庫中擴增獲得Akt1和AIF基因,構(gòu)建融合Flag標簽的Akt1(pFlag-Akt1)和融合Myc標簽的AIF(pMyc-AIF)真核表達重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染細胞后通過免疫共沉淀反應,檢測二者在體內(nèi)的結(jié)合情況;構(gòu)建融合GST標簽的AIr原核表達重組質(zhì)粒,誘導表達并純化后獲得融合蛋白GST-AIF,通過GST-pull down實驗檢測GST-AIF與融合Flag標簽的Akt1蛋白在體外的結(jié)合情況;構(gòu)建融合GFP標簽的AIF的真核表達重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染細胞,觀察在凋亡信號刺激下AIF的轉(zhuǎn)位情況,及Akt1的活化對該過程的影響.結(jié)果 察Akt1可與AIF在細胞內(nèi)、外結(jié)合,且活化的Akt1對AIF在凋亡信號刺激下的核轉(zhuǎn)位具有抑制作用.結(jié)論 活化的Akt1可能通過抑制AIF在凋亡信號刺激F的核轉(zhuǎn)位過程而發(fā)揮其抗凋亡活性.

作 者： 李圍 楊曉明 LI Wei YANG Xiaoming   作者單位： 軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所,北京市,100850  刊 名： 醫(yī)學分子生物學雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2008 5(4)  分類號： Q71  關鍵詞： 蛋門激酶B   凋亡誘導因子   基因的表達與構(gòu)建  

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