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GST-hDSL重組蛋白的原核表達(dá)純化及對人造血祖細(xì)胞的擴增作用

時間:2023-04-26 16:48:26 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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GST-hDSL重組蛋白的原核表達(dá)純化及對人造血祖細(xì)胞的擴增作用

目的:原核表達(dá)DSL與谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)的融合蛋白并研究觀察GST-hDSL對人臍帶血CD34+造血祖細(xì)胞的體外擴增作用.方法:將人DSL cDNA的蛋白編碼序列克隆入原核表達(dá)載體pGEX-2T中,在大腸桿菌DH5α中誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,用DEAE陰離子交換柱純化目的蛋白.然后分離、純化臍帶血CD34+造血祖細(xì)胞,不加細(xì)胞因子或加入SCF(干細(xì)胞生長因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),經(jīng)過14天的培養(yǎng),檢測GST-hDSL對細(xì)胞總數(shù)、CD34+細(xì)胞百分率、以及集落形成的影響.結(jié)果:當(dāng)SCF和GM-CSF存在時,GST-hDSL組的CD34+細(xì)胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)數(shù)以及高增值潛能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)數(shù)分別是時照組的1.9、1.2、5.3倍.結(jié)論:當(dāng)與SCF和GM-CSF聯(lián)合作用時,重組GST-hDSL蛋白對造血祖細(xì)胞具有擴增作用.

作 者: 林小娟 黃薇薇 趙梅 姜俊芬 郭凌晨 吳明媛 韓偉 LIN Xiao-Juan HUANG Wei-Wei ZHAO Mei JIANG Juan-Fen GUO Ling-Chen WU Ming-Yuan HAN Wei   作者單位:   刊 名: 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展  ISTIC 英文刊名: PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE  年,卷(期): 2008 8(4)  分類號: Q291  關(guān)鍵詞: GST-hDSL   Notch通路   造血祖細(xì)胞  

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