貴陽(yáng)腐霉幾丁質(zhì)酶的活性及基因片段克隆與序列

目的: 研究貴陽(yáng)腐霉(Pythium guiyangense Su)幾丁質(zhì)酶的活性及其基因片段的克隆與序列分析.方法: (1) 采用3,5-二硝基水楊酸比色法測(cè)定貴陽(yáng)腐霉分泌的幾丁質(zhì)酶活性;(2)根據(jù)NCBI Protein 數(shù)據(jù)庫(kù)中多種生物的幾丁質(zhì)酶氨基酸序列的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物,以貴陽(yáng)腐霉基因組DNA為模版,通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得特異性DNA片段;(3)將該片段克隆并進(jìn)行測(cè)序分析.結(jié)果: 貴陽(yáng)腐霉經(jīng)誘導(dǎo)后可以分泌幾丁質(zhì)酶.誘導(dǎo)24 h是該酶分泌高峰期.克隆到一207?bp的DNA片段,其第182～207堿基序列與狗(Canis familiaris)的幾丁質(zhì)酶基因的部分序列相同.結(jié)論: 本實(shí)驗(yàn)證明貴陽(yáng)腐霉核DNA含有幾丁質(zhì)酶基因,在幾丁質(zhì)類(lèi)似物的誘導(dǎo)下,該菌可以分泌幾丁質(zhì)酶.所克隆的DNA片段可能是幾丁質(zhì)酶基因的部分序列.

作 者： 洪焱 蘇曉慶 HONG Yan SU Xiaoqing   作者單位： 洪焱,HONG Yan(貴陽(yáng)市婦幼保健院生殖遺傳科)

蘇曉慶,SU Xiaoqing(貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院,生物學(xué)教研室,貴州,貴陽(yáng),550004) 

刊 名： 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2008 33(1)  分類(lèi)號(hào)： Q949.323.3 Q936  關(guān)鍵詞： 真菌   滅蚊   聚合酶鏈反應(yīng)   貴陽(yáng)腐霉   幾丁質(zhì)酶   幾丁質(zhì)酶活性  

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