以β-半乳糖苷酶為報(bào)告基因的原核啟動(dòng)子檢測(cè)體系構(gòu)建

目的:以β-半乳糖苷酶為報(bào)告基因構(gòu)建原核啟動(dòng)子檢測(cè)體系.方法:以由質(zhì)粒 pDL 擴(kuò)增獲得的 bgaB 基因?yàn)閳?bào)告基因,將其克隆到大腸桿菌-枯草桿菌穿梭載體 pBE2,構(gòu)建成一個(gè)具有啟動(dòng)子活性檢測(cè)功能的重組質(zhì)粒pBEB.將組成型啟動(dòng)子P43和誘導(dǎo)型啟動(dòng)子Pcpac克隆入 pBEB,得到重組表達(dá)載體 pBEBP43 和 pBEBPapac,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌和枯草芽孢桿菌.結(jié)果:兩種不同類(lèi)型的啟動(dòng)子均能在大腸桿菌 BL21 和枯草芽孢桿菌 1A751 中啟動(dòng) bgaB 基因的表達(dá).結(jié)論:成功構(gòu)建具有較為廣泛適用性的原核啟動(dòng)子檢測(cè)體系.

作 者： 陳坤 黎明 樊欣迎 路福平 CHEN Kun LI Ming FAN Xin-ying LU Fu-ping   作者單位： 天津市工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院,天津,300457  刊 名： 生物技術(shù)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(1)  分類(lèi)號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： β-半乳糖苷酶   啟動(dòng)子活性檢測(cè)   大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭載體  

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