膽固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表達(dá)

根據(jù)NCBI中報(bào)道的Brevibacterium sterolicum ATCC21387膽固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacterium sp.DGCDC-82的基因組為模板,擴(kuò)增得到了編碼膽固醇氧化酶的基因,該基因與來源于Brevibacterium sterolicum ATCC21387的膽固醇氧化酶基因(choB)同源性為98%.將得到的基因定向克隆到pET28a載體中,轉(zhuǎn)化至含有編碼argU和proL基因的大腸桿菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表達(dá).經(jīng)過IPTG誘導(dǎo)后,經(jīng)SDS-PAGE檢測在約55kD處有一蛋白表達(dá)條帶,目的蛋白表達(dá)量約占總蛋白的16%,經(jīng)測定酶活為340U/L.

作 者： 王龍剛 鄔敏辰 王武 WANG Long-Gang WU Min-Chen WANG Wu   作者單位： 江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,無錫,214036  刊 名： 微生物學(xué)通報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： MICROBIOLOGY  年，卷(期)： 2006 33(6)  分類號： Q93  關(guān)鍵詞： Brevibacterium sp.DGCDC-82   膽固醇氧化酶   克隆   原核表達(dá)  

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