利用轉(zhuǎn)基因標(biāo)記NPTⅡ快速、規(guī)�；�純合轉(zhuǎn)基因番茄

利用卡那霉素噴施方法對(duì)帶有NPTⅡ標(biāo)記基因和雙價(jià)外源基因(煙草滲調(diào)蛋白基因AP24和菜豆幾丁質(zhì)酶基因Chi)的轉(zhuǎn)基因番茄的3個(gè)世代在溫室或田間環(huán)境進(jìn)行規(guī)模化篩選,成功獲得8個(gè)單拷貝轉(zhuǎn)基因純合植株.含有單個(gè)拷貝NPTⅡ標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因株系后代,對(duì)卡那霉素的抗感分離符合3 ∶1的孟德?tīng)柗蛛x比例,T2代中一些株系表現(xiàn)為對(duì)卡那霉素全抗,表明這些株系的外源基因已經(jīng)純合,這一結(jié)果在T3代中進(jìn)一步得到證實(shí).但對(duì)于含有兩個(gè)拷貝外源基因的轉(zhuǎn)基因株系,外源基因的遺傳則比較復(fù)雜.同時(shí),結(jié)合Km噴施和多重PCR技術(shù)對(duì)外源基因的異常遺傳進(jìn)行了初步分析.用PCR分析進(jìn)一步證實(shí)了該方法的準(zhǔn)確性,該方法是對(duì)轉(zhuǎn)基因番茄進(jìn)行大規(guī)模、快速遺傳分析的理想方法.

作 者： 歐陽(yáng)波 龍芳 張揚(yáng)勇 葉志彪 OUYANG Bo LONG Fang ZHANG Yang-Yong YE Zhi-Biao   作者單位： 歐陽(yáng)波,OUYANG Bo(作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢,430070;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院,武漢,430070)

龍芳,張揚(yáng)勇,LONG Fang,ZHANG Yang-Yong(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院,武漢,430070)

葉志彪,YE Zhi-Biao(作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢,430070) 

刊 名： 武漢植物學(xué)研究  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH  年，卷(期)： 2006 24(1)  分類(lèi)號(hào)： Q3-3  關(guān)鍵詞： NPTⅡ   卡那霉素   多重PCR   轉(zhuǎn)基因番茄   遺傳分析  

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