腺病毒介導(dǎo)EGFP基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

目的 探討腺病毒(adenovirus)介導(dǎo)的增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)基因在神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)的表達(dá)規(guī)律及轉(zhuǎn)染對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化的影響.方法 用不同感染復(fù)數(shù)的攜帶EGFP基因的腺病毒(Ad/EGFP)轉(zhuǎn)染NSCs,在熒光倒置相差顯微鏡下觀察EGFP的表達(dá)情況,同時(shí)用臺(tái)盼藍(lán)染色、細(xì)胞球計(jì)數(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法分別檢測(cè)對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的活力、增殖、分化情況.結(jié)果 Ad/EGFP轉(zhuǎn)染16 h后NSCs發(fā)出綠色熒光,在第7天左右熒光強(qiáng)度達(dá)高峰并可持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)20天左右,Nestin表達(dá)陽性.在分化后細(xì)胞的胞體與突起均可見綠色熒光,部分細(xì)胞β-Ⅲ tubulin、GFAP表達(dá)陽性.同時(shí)觀察到對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組的NSCs在第7天、14天、21天時(shí)細(xì)胞活力、增殖、分化情況均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05).結(jié)論 Ad/EGFP可以高效轉(zhuǎn)染新生大鼠海馬NSCs,且不影響NSCs的存活、生長(zhǎng)和分化.EGFP基因是神經(jīng)干細(xì)胞的理想的報(bào)告基因.

作 者： 歐陽長(zhǎng)杰 趙玉 徐鐵軍 OUYANG Chang-jie ZHAO Yu XU Tie-jun   作者單位： 徐州醫(yī)學(xué)院解剖與神經(jīng)生物學(xué)教研室,江蘇,徐州,221002  刊 名： 徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU  年，卷(期)： 2007 27(7)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 神經(jīng)干細(xì)胞   腺病毒   增強(qiáng)型綠色熒光蛋白   轉(zhuǎn)染   基因表達(dá)  

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