應(yīng)用膜反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)耐異煙肼結(jié)核分支桿菌基因型

目的 應(yīng)用膜反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)快速檢測(cè)結(jié)核分支桿菌對(duì)異煙肼(INH)耐藥性.方法 設(shè)計(jì)與合成用于檢測(cè)結(jié)核分支桿菌耐INH kat、inhA基因的寡核苷酸探針,點(diǎn)于硝酸纖維素膜上,與結(jié)核分枝桿菌臨床分離株生物素標(biāo)記的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)產(chǎn)物進(jìn)行反向斑點(diǎn)雜交.結(jié)果 20株INH敏感株中,僅9例出現(xiàn)野生型探針K1陽(yáng)性雜交,余11株中,10株K1b'雜交陽(yáng)性,PCR-DS顯示KatG基因315位密碼子AGC→ACC,1株K1c'雜交陽(yáng)性,PCR-DS顯示KatG基因315位密碼子AGC→ACC;15株出現(xiàn)野生型探針inh1陽(yáng)性雜交,另5株Inhal探針雜交陽(yáng)性,PCR-DS顯示inhA基因-15位C→T突變.36株耐藥株中,17株K1探針雜交陽(yáng)性,18株K1b'雜交陽(yáng)性,1株與所試探針不雜交,PCR-DS顯示KatG基因279位密碼子GGC→GAC;11株與突變型Inhal探針陽(yáng)性雜交,25株野生型探針inhl雜交陽(yáng)性.KatG基因膜雜交突變檢出率為50%,inhA基因膜雜交突變檢出率為30.56%.結(jié)論 膜反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)可成為檢測(cè)部分結(jié)核分支桿菌耐異煙肼基因型簡(jiǎn)便、快速的方法.

作 者： 梁建琴 吳雪瓊 張俊仙 李洪敏 陸陽(yáng) LIANG Jian-qin WU Xue-qiong ZHANG Jun-xian LI Hong-min LU Yang   作者單位： 北京解放軍309醫(yī)院,結(jié)核病研究室,北京,100091  刊 名： 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE  年，卷(期)： 2006 16(15)  分類(lèi)號(hào)： Q789  關(guān)鍵詞： 結(jié)核分支桿菌   異煙肼   KatG   inhA   藥物耐受性   聚合酶鏈反應(yīng)   反向斑點(diǎn)雜交  

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