人IGF-1在大腸桿菌中的可溶表達和純化

目的:在大腸桿菌中的可溶表達和純化人胰島素樣生長因子1(hIGF-1).方法:根據(jù)hIGF-1的氨基酸序列和大腸桿菌密碼子偏愛性,利用重疊延伸PCR的方法合成hIGF-1 DNA序列,構(gòu)建表達載體,在大腸桿菌Origami B(DE3)中與硫氧還蛋白Trx A融合表達,并通過鹽析和鎳柱親合層析進行純化.結(jié)果:SDS-PAGE分析顯示,重組融合蛋白以可溶形式存在,分子量約為28 kDa,占上清總蛋白的50%以上.經(jīng)鹽析和鎳柱親合層析進行純化,目標蛋白純度可達到90%左右.結(jié)論:復合干擾素在大腸桿菌中的高效可溶表達.

作 者： 張守濤 梁會娟 張蕓   作者單位： 張守濤(鄭州大學生物工程系,河南鄭州,450001)

梁會娟,張蕓(河南富邦藥業(yè)有限公司,河南鄭州,450001) 

刊 名： 生物技術(shù)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 20(2)  分類號： Q819 Q786  關(guān)鍵詞： 人胰島素樣生長因子1   硫氧還蛋白   可溶表達   純化   Higf-1   Trx A   soluble expression   purification  

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