不同啟動子驅(qū)動下馬鈴薯蛋白酶抑制劑PinⅡ轉(zhuǎn)基因水稻的遺傳、表達和對粘蟲抗性分析

以不同啟動子驅(qū)動的馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ基因(PinⅡ-2x,PinⅡ-4x)轉(zhuǎn)基因水稻為材料,經(jīng)潮霉素抗性、PCR和Southern blot等檢測對轉(zhuǎn)基因水稻后代進行了遺傳分析.結(jié)果顯示:外源基因在68.4%的轉(zhuǎn)基因植株中符合孟德爾遺傳模式,單拷貝植株率為63.6%.轉(zhuǎn)基因植株后代的PinⅡ蛋白活性測定結(jié)果表明:Actl和Ubi驅(qū)動的PinⅡ-2x轉(zhuǎn)基因水稻植株中,每克鮮葉片的PinⅡ蛋白含量為160 μg和176 μg,而由PIN5′驅(qū)動的PinⅡ-4x為104 μg,對照水稻僅為20 μg.Actl和Ubi驅(qū)動的PinⅡ表達產(chǎn)物對胰蛋白酶活性抑制程度分別達到37.7%和43.1%,明顯高于PinⅡ自身啟動子PIN5′(29.2%).葉片飼養(yǎng)粘蟲幼蟲的實驗表明:轉(zhuǎn)基因植株葉片對粘蟲有抗性,但抗性達不到顯著水平,且啟動子效率、PinⅡ表達量與抗粘蟲性之間也沒有相關(guān)性.

作 者： 武亮 卜慶云 周明 楊世湖 萬建民 WU Liang BU Qing-Yun ZHOU Ming YANG Shi-Hu WAN Jian-Min   作者單位： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國家重點實驗室,江蘇省植物基因工程研究中心,南京,210095  刊 名： 遺傳  ISTIC PKU 英文刊名： HEREDITAS(BEIJING)  年，卷(期)： 2006 28(3)  分類號： Q943  關(guān)鍵詞： 馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ   遺傳   活性   粘蟲  

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