人骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)及鑒定

目的:體外分離、培養(yǎng)、鑒定人骨髓間充質干細胞(hBMSC).方法:利用密度梯度離心法分離出人骨髓單個核細胞(MNC),通過貼壁篩選法建立hBMSC的體外培養(yǎng)體系,并通過一系列檢測方法對所培養(yǎng)的細胞進行鑒定.結果:細胞主要呈"成纖維樣",但體積較大、形狀不規(guī)則、細胞質突起多,細胞核大而疏松,核仁明顯.流式細胞儀檢測:CD34陽性率為2.09%、CD29陽性率為94.46%;CD54及CD105表達陽性.細胞周期及透射電鏡檢測提示細胞處于相對原始狀態(tài).免疫細胞化學染色顯示:CD14、CD45、膠原蛋白Ⅱ呈陰性;CD106、CD166、纖維連接蛋白、波形蛋白及膠原纖維酸性蛋白呈陽性.細胞化學染色:糖原染色呈強陽性;堿性磷酸酶染色呈陰性.通過誘導分化培養(yǎng)可誘導出成骨細胞.結論:成功建立了穩(wěn)定的hBMSC體外培養(yǎng)體系,按照此培養(yǎng)體系進行培養(yǎng)可獲得hBMSC.hBMSC可傳代培養(yǎng),但在培養(yǎng)過程中細胞逐漸出現老化現象,且不能凍存.

作 者： 梁雪 粟永萍 孔佩艷 陳幸華 彭賢貴 徐輝 曾東風 艾國平 LIANG Xue SU Yong-ping KONG Pei-yan CHEN Xing-hua PENG Xian-gui XU Hui ZENG Dong-feng AI Guo-ping   作者單位： 梁雪,孔佩艷,陳幸華,彭賢貴,曾東風,LIANG Xue,KONG Pei-yan,CHEN Xing-hua,PENG Xian-gui,ZENG Dong-feng(第三軍醫(yī)大學附屬新橋醫(yī)院血液科,重慶,400037)

粟永萍,徐輝,艾國平,SU Yong-ping,XU Hui,AI Guo-ping(預防醫(yī)學院解放軍復合傷研究所創(chuàng)傷、燒傷與復合傷國家重點實驗室,重慶,400038) 

刊 名： 醫(yī)學研究生學報  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES  年，卷(期)： 2007 20(5)  分類號： Q813.11  關鍵詞： 人骨髓間充質干細胞   造血微環(huán)境   細胞培養(yǎng)  

【人骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)及鑒定】相關文章：

體外誘導骨髓間充質干細胞向肝細胞樣細胞方向分化04-27

兔骨髓間充質干細胞獲取與特性的實驗研究04-26

HMGB1促進人骨髓間充質干細胞遷移的實驗研究04-26

Bcl-2基因轉染對骨髓間充質干細胞體外模擬缺血性損傷保護作用的實驗研究04-27

bFGF促進大鼠骨髓間充質干細胞向神經膠質樣細胞轉分化04-27

骨髓間充質干細胞誘導分化為心肌細胞的研究進展04-26

精原干細胞移植及體外培養(yǎng)研究進展04-26

間充質干細胞分化為心肌樣細胞與P120連環(huán)蛋白mRNA表達04-27

腺病毒介導的白介素10基因體外轉導大鼠β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干細胞04-26

人類原始生殖細胞的體外培養(yǎng)04-26