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雙色紅外熒光技術(shù)在蛋白磷酸化檢測(cè)中的應(yīng)用
目的通過(guò)與化學(xué)發(fā)光法比較,了解雙色紅外熒光技術(shù)在目標(biāo)蛋白磷酸化檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì).方法分別取內(nèi)毒素休克小鼠不同時(shí)間肺組織,制備組織勻漿蛋白樣品.用SDS-PAGE電泳分離后轉(zhuǎn)膜,將膜分別與磷酸化的或/和總的p42/44 MAPK抗體孵育,二抗用耦聯(lián)有Alexa Fluor 680和IRDye 800的熒光抗體或辣根過(guò)氧化物酶抗體,通過(guò)雙色紅外熒光系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行蛋白質(zhì)磷酸化檢測(cè).結(jié)果紅外熒光檢測(cè)技術(shù)和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)結(jié)果均顯示內(nèi)毒素處理后小鼠肺組織p42/44 MAPK磷酸化水平發(fā)生了改變,1 h最高,12 h以后逐漸恢復(fù)到接近正常水平.兩種方法檢測(cè)結(jié)果顯示了較好的一致性,相比之下雙色紅外熒光技術(shù)具有更高的靈敏度、操作方便、節(jié)省時(shí)間及可以同時(shí)檢測(cè)兩種蛋白等優(yōu)點(diǎn).結(jié)論雙色紅外熒光技術(shù)在蛋白磷酸化的檢測(cè)方面具有較好的應(yīng)用前景.
作 者： 劉靖華 唐靖 藍(lán)興國(guó) 劉亞偉 李志杰 陳芳 鄧鵬 姜勇 LIU Jing-hua TANG Jing LAN Xing-guo LIU Ya-wei LI Zhi-jie CHENG Fang DENG Peng JIANG Yong 作者單位： 劉靖華,唐靖,藍(lán)興國(guó),劉亞偉,李志杰,鄧鵬,姜勇,LIU Jing-hua,TANG Jing,LAN Xing-guo,LIU Ya-wei,LI Zhi-jie,DENG Peng,JIANG Yong(南方醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室和廣東省功能蛋白質(zhì)組重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,廣州,510515)陳芳,CHENG Fang(基因有限公司,上海,200233)
刊 名： 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 26(2) 分類(lèi)號(hào)： Q51 關(guān)鍵詞： 蛋白質(zhì)磷酸化 雙色紅外熒光 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)【雙色紅外熒光技術(shù)在蛋白磷酸化檢測(cè)中的應(yīng)用】相關(guān)文章：
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