誘騙受體DcR3的基因構(gòu)建、表達(dá)及特異性鑒定

目的: 構(gòu)建適于原核表達(dá)的人誘騙受體DcR3基因, 并進(jìn)行重組蛋白的表達(dá)純化及特異性鑒定.方法: 查得人DcR3 Cdna全序列, 將其分段設(shè)計(jì)引物, 通過重疊PCR獲得DcR3基因.構(gòu)建Pet-22b(+)/DcR3表達(dá)載體, 轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosseta-gami, IPTG誘導(dǎo)表達(dá), Ni柱純化.采用ELISA進(jìn)行特異性鑒定.結(jié)果: 通過重疊PCR獲得了編碼正確氨基酸序列的目的基因.目的蛋白以包涵體的形式表達(dá), 表達(dá)量占菌體總蛋白的30%以上.純化后, 蛋白純度達(dá)95%以上.ELISA結(jié)果表明所純化的蛋白可與抗DcR3抗體發(fā)生特異結(jié)合.結(jié)論: 誘騙受體DcR3基因的成功構(gòu)建、表達(dá)及純化, 為進(jìn)一步的功能研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 李文珠 陶惠然 顏江華 張長(zhǎng)弓 蘇金華 王階平 楊桂旺 莊國(guó)洪   作者單位： 李文珠,王階平,楊桂旺,莊國(guó)洪(廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建,廈門,361005)

陶惠然,顏江華,張長(zhǎng)弓,蘇金華(廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院抗癌研究中心,福建,廈門,361005) 

刊 名： 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： DcR3   基因構(gòu)建   基因表達(dá)  

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