DNA末端定量及其應(yīng)用的研究

為定量DNA斷裂末端評(píng)價(jià)DNA的降解程度,以飽和標(biāo)記(TdT)法定量DNA末端最大標(biāo)記量(Lmax);并用流式細(xì)胞分析(FCA)、原位DNA末端標(biāo)記(TUNEL)和瓊脂糖電泳檢測(cè)或標(biāo)記DNA降解片段.結(jié)果發(fā)現(xiàn): a.TdT法最低檢測(cè)限5 ng DNA,線性范圍為5～5 000 ng,較檢測(cè)DNA降解片段的瓊脂糖電泳敏感200倍以上;b.地塞米松(DEX)誘導(dǎo)淋巴瘤(Raji)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生的Lmax呈DEX劑量與誘導(dǎo)時(shí)間依賴性增加;c.自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)心肌的?Lmax呈年齡依賴性增加并與正常對(duì)照鼠(WKY)相比差異非常顯著(P?＜0 01);d T dT法定量?Lmax?與FCA、TUNEL或電泳分析的相關(guān)性良好(r＞0 98).TdT法定量?Lmax敏感、特異、準(zhǔn)確,可應(yīng)用于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),尤其是細(xì)胞凋亡動(dòng)力學(xué)DNA降解評(píng)價(jià)的定量研究.

作 者： 彭黎明 江虹 J.J.LIU C.J.BRADLEY PENG Li-Ming JIANG Hong J.J.LIU C.J.BRADLEY   作者單位： 彭黎明,江虹,PENG Li-Ming,JIANG Hong(華西醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)檢專業(yè),成都,610041)

J.J.LIU,C.J.BRADLEY,J.J.LIU,C.J.BRADLEY(Department of Pathology, University of Melbourne Austin Hospital, Heidelberg, VIC 3084, Australia) 

刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(5)  分類號(hào)： Q34 Q73  關(guān)鍵詞： DNA末端   飽和標(biāo)記   終末核苷酸轉(zhuǎn)移酶?  

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