利用煙草表達(dá)人凝血Ⅸ因子(hFIX)的研究

血友病B是凝血Ⅸ因子(hFIX)缺乏所導(dǎo)致的一種出血性疾病,通過輸血和hFIX濃縮劑進(jìn)行治療療效顯著,但存在治療費(fèi)用高和安全隱患,因而獲得安全、廉價(jià)的人凝血Ⅸ因子對(duì)血友病B治療具有重要意義.植物系統(tǒng)表達(dá)外源蛋白在生產(chǎn)成本和安全性方面具有優(yōu)勢(shì).為此,構(gòu)建含人凝血Ⅸ因子基因(hFIX,2.8kb)植物雙元表達(dá)載體p35s-2300∷gus∷noster,用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化煙草"百日紅",通過PCR和Southern blot分析證實(shí)獲得4株獨(dú)立轉(zhuǎn)基因植株,hFIX在轉(zhuǎn)基因煙草基因組中的拷貝數(shù)為1～4個(gè);RT-PCR和ELISA檢測(cè)結(jié)果表明,hFIX在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平已成功表達(dá),hFIX在轉(zhuǎn)基因煙草葉片中的表達(dá)量為2.5～8.8ng/g·FW,并具有免疫活性.為利用植物系統(tǒng)表達(dá)hFIX的后續(xù)研究作了必要準(zhǔn)備,也為利用植物系統(tǒng)表達(dá)其他藥用蛋白研究提供了一些理論和實(shí)驗(yàn)參考.

作 者： 趙凌俠 張凌 魏捷 開國銀 李柱剛 錢虹妹 張慧 唐克軒 ZHAO Ling-xia ZHANG Ling WEI Jie KAI Guo-yin LI Zhu-gang QIAN Hong-mei ZHANG Hui TANG Ke-xuan   作者單位： 趙凌俠,張凌,魏捷,錢虹妹,張慧,唐克軒,ZHAO Ling-xia,ZHANG Ling,WEI Jie,QIAN Hong-mei,ZHANG Hui,TANG Ke-xuan(上海交通大學(xué)植物生物技術(shù)研究中心,上海,200030)

開國銀,KAI Guo-yin(上海交通大學(xué)植物生物技術(shù)研究中心,上海,200030;上海師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,上海,200234)

李柱剛,LI Zhu-gang(上海交通大學(xué)植物生物技術(shù)研究中心,上海,200030;黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心,哈爾濱,150086) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號(hào)： Q81  關(guān)鍵詞： 人凝血Ⅸ因子   煙草  

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