腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)綜述論文

　　細(xì)胞癌變及惡性腫瘤的形成是多因素、多階段、多基因變異所致的結(jié)果。在食管癌的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中也有許多癌基因和抑癌基因發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能的變化，出現(xiàn)失活和異常表達(dá)n0]。目前在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中已廣泛開(kāi)展應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)研究癌基因的突變狀況。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(PCR—SSCP)法檢測(cè)食管鱗狀細(xì)胞癌組織中P53抑癌基因的突變，旨在研究1：''53基因突變與腫瘤的分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的關(guān)系。

　　1資料與方法

　　1．1一般資料

　　選取我院2009—2010年食管鱗狀細(xì)胞癌患者36例，男25例，女11例；年齡39-75歲，中位年齡59歲；其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例。

　　1．2方法

　　1．2．1提取DNA：取手術(shù)切除標(biāo)本，取組織蠟塊切片10片，厚度為1O一20m，放入試管中，用酚氯仿法提取DNA。試劑由達(dá)柯公司提供。

　　1．2．2PCR．SSCP：正常對(duì)照采用人外周血白細(xì)胞DNA；P53基因第5、6、7和8外顯子，片段長(zhǎng)度分別為21lbp、185bp、139bp、200bp。PCR反應(yīng)條件：94℃保溫lmin、55℃40s、72℃30s共32個(gè)循環(huán)后72℃延伸5min，反應(yīng)完成后，取5l產(chǎn)物行2％瓊脂糖凝膠電泳鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物。然后取1OPCR產(chǎn)物加等量變性上樣指示劑，沸水中變性8min，立即冰浴5min，取6上樣于8％非變性聚丙烯酰胺凝膠行垂直電泳。

　　1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　計(jì)數(shù)資料以率(％)表示，組間比較采用檢驗(yàn)，P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2結(jié)果

　　2．1P53基因的突變與人外周血白細(xì)胞DNA譜帶對(duì)照，突變的標(biāo)本顯示異常泳動(dòng)帶，表現(xiàn)在增多、減少或變位。在36例食管鱗狀細(xì)胞癌組織中出現(xiàn)P53基因突變l4例，突變率為38．89％，其中第5外顯子4例、第6外顯子3例、第7外顯子2例、第8外顯子5例。作者單位：450052鄭州市，鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院病理科

　　2．2腫瘤分化程度與P53基因突變的關(guān)系依據(jù)常規(guī)病理，將食管鱗狀細(xì)胞癌的分化程度分為高分化、中分化、低分化癌。36例食管鱗狀細(xì)胞癌患者中，高分化癌9例，P53基因突變2例(22．22％)；中分化癌l6例，P53基因突變5例(31．25％)；低分化癌11例，P53基因突變7例(6364％)。低分化癌的P53基因突變率明顯高于中分化、高分化癌的突變率(P<0．05)。

　　2．3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與P53基因突變的關(guān)系36例食管鱗狀細(xì)胞癌患者中，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者2l例，P53基因突變l2例(57．14)％；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者15例，P53基因突變2例(13．33％)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者P53基因突變率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者突變率(P<0．05)。

　　3討論

　　本文36例食管鱗癌患者中發(fā)生P53基因突變l4例，突變率為38．89％，表明在食管鱗癌發(fā)生時(shí)，有較高P53基因突變率。P53基因在正常細(xì)胞生長(zhǎng)分化過(guò)程中起著負(fù)調(diào)控作用，而突變的P53基因則失去了正常P53基因的功能，引起細(xì)胞惡性增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。P53基因位于染色體17P13，是人類腫瘤中突變率較高的抑癌基因，突變點(diǎn)多在5—8外顯子。大量研究證實(shí)P53基因突變參與了食管鱗癌的發(fā)生與進(jìn)展，在食管鱗癌中有較高P53基因突變率。本結(jié)果表明：(1)低分化癌的P53基因突變率明顯高于中分化、高分化癌的突變率(P<0．05)；(2)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者P53基因突變率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者突變率(P<0．05)。綜上所述，腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與P53基因突變有相關(guān)性。

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