化學(xué)專業(yè)實習(xí)報告 -實習(xí)報告

　　學(xué)號 02122035 姓名 陳陽 班級 生物工程22班

　　 實習(xí)工廠 大慶油田化學(xué)劑及水處理質(zhì)量檢驗中心 實習(xí)時間 XX年8月1日至XX年8月21日

　　 考核成績 優(yōu)秀 指導(dǎo)老師 劉廣民

　　

　　 生產(chǎn)實習(xí)是學(xué)校為鍛煉本科生能力，讓我們能更好的與社會相適應(yīng)而組織的大三本科生的生產(chǎn)實踐活動。接到要去生產(chǎn)實習(xí)的通知后，我很高興，并積極聯(lián)系，終于將實習(xí)地點定在大慶油田水處理與化學(xué)研究所。這是因為：首先，水化室的主要工作是油田水處理，化學(xué)劑量開發(fā)及檢驗，和我們的專業(yè)有一定的關(guān)系；其次，我們的課程當(dāng)中并未涉及到有關(guān)水生細菌的詳細知識，在這里進行生產(chǎn)實習(xí)可以擴展這方面的知識；我們在實驗中所學(xué)習(xí)的操作方法可以得到應(yīng)用基于以上幾方面的原因，我選擇在水處理所開始我的生產(chǎn)實習(xí)。

　　 水處理與化學(xué)研究所隸屬于大慶油田工程設(shè)計開發(fā)有限公司，原名大慶油田建設(shè)設(shè)計水處理及油田化學(xué)研究室（水化室）位于黑龍江省大慶市讓胡路區(qū)油田設(shè)計院。多年來研制出原油破乳劑、油田清防蠟劑、油田防蠟劑、原油降粘劑、原油消泡劑、污水絮凝劑、防垢劑、緩蝕劑等12個系列40余種油田化學(xué)劑。

　　 該所現(xiàn)有高中級職稱的專業(yè)人才32人，博士2人，碩士8人。XX年通過了國家級計量認證。同年與哈爾濱工業(yè)大學(xué)強強聯(lián)合，成立了哈爾濱工業(yè)大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程大慶研發(fā)中心。擁有研究儀器設(shè)備100多臺（套），其中進口設(shè)備占60%實驗室總面積為3000平方米。微生物實驗室，可進行菌種培養(yǎng)馴化分離。擁有國內(nèi)規(guī)模裝備最為先進的三次采油實驗室，可進行各種除油及過濾工藝和設(shè)備試驗可自動合成的高壓聚合反應(yīng)實驗室。

　　 由于我的實習(xí)時間只有三個星期，故在劉老師的安排下對SRB做些認知性的實習(xí)，以下為我的主要實習(xí)內(nèi)容

　　 大致了解實驗室自XX年開始啟動的SRB抑制課題的一些工藝原理流程

　　 硫酸鹽還原菌（SRB）是導(dǎo)致大慶油田地面系統(tǒng)產(chǎn)生硫化物從而造成設(shè)備腐蝕、濾料污染等危害的根源;實驗室立足于微生物生態(tài)抑制，改變以往追求殺滅SRB數(shù)量的目的，轉(zhuǎn)而以抑制SRB活性為目的,是大慶油田系統(tǒng)控制SRB危害的新方法，可降低生產(chǎn)運行成本

　　 本研究采用的折流板反應(yīng)器有7個單元格，每個單元格長*寬*高=9.5cm*12cm*42cm,有效體積4.4L,單元格內(nèi)裝1/3高度的活性污泥.反應(yīng)器上部為排氣孔，排氣孔的導(dǎo)氣管伸到水封瓶液面以下，保持整個系統(tǒng)厭氧狀態(tài).

　　 水箱中的水通過泵泵入反應(yīng)器，以推流形式流過各單元格，并從反應(yīng)器流出。

　　 反應(yīng)器的啟動與運行

　　 將含有大量的硫酸鹽還原菌的厭氧污泥，接種到反應(yīng)器中；

　　 現(xiàn)階段，反應(yīng)器進水為配制的模擬水，在自來水中加入碳源（白糖）、硫酸鈉、少量復(fù)合肥，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)堿度；濃度：COD=1800mg/L,SO42-=600mg/L左右;進水流量46L/d, 每個單元格水力停留時間（HRT）=2.3hr

　　 一、微生物鏡下觀察

　　 G氏染色

　　 步驟為：涂片→固定→結(jié)晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復(fù)染→水洗→干燥→觀察。

　　 涂片 與單染色法相同。

　　 固定 與單染色法相同。

　　 結(jié)晶紫染色 染色1分鐘，然后水洗并用吸水紙吸干。

　　 碘液媒染 染色1分鐘，然后水洗并吸干。

　　 酒精脫色 用95%酒精脫色，直到酒精不出現(xiàn)紫色時即停止（大約半分鐘），然后立即水洗，并吸干。

　　 番紅復(fù)染 染色3分鐘左右，然后水洗并吸干。

　　 鏡檢 在顯微鏡油鏡頭下觀察，菌體顯藍紫色的為革蘭氏陽性菌；菌體顯紅色的為革蘭氏陰性菌。

　　 SRB為革蘭氏陰性菌（具體操作中由于番紅變質(zhì)幾次實驗結(jié)果均不理想）

　　 二、厭氧型為生物的培養(yǎng)（SRB和DNB的富集）

　　 1.SRB菌

　　 采用

Hungate厭氧操作技術(shù)、絕跡稀釋法（MPN）以及“滾管”培養(yǎng)對樣本進行分離，多次純化獲得純菌株SRB。

　　 具體方法：向改良后Starkey培養(yǎng)基（K2HPO4 0.5g，NH4CI 1.0g ，Na2SO4 10g ，CaCI2•2H2O 0.1g ，MgSO4•7H2O 2.0g，酵母膏 6.0g ，60%的乳酸鈉溶液 6ml，蒸餾水1000 ml，pH=7.8）中加入0.2%的刃天青溶液，培養(yǎng)基煮沸后，加入L-半光鹽酸鹽0.5g，通入高純氮氣驅(qū)氧30min，121℃滅菌20min，固體培養(yǎng)基加入16%的瓊脂糖。

　　 單獨配 3%的FeSO4•(NH4)2 SO4 厭氧

　　 SRB菌株于液體培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)48h 后, 在Olympus COVER-018光學(xué)顯微鏡下革蘭氏染色觀察。

　　 2.DNB菌

　　 方法同SRB菌，PH值最好在7，

　　 藥品：

　　 (NH4 ) 2SO4 3 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, M gSO4•7H2O 0.5g,

　　 Ca (NO3 )2 0.01 g, FeSO4•7H2O 8.0 g, 蒸餾水1 000 mL

　　 121℃滅菌15 m in。

　　 恒溫搖床培養(yǎng)箱振蕩培養(yǎng)

　　 由于此項操作開始時間較晚，至實習(xí)結(jié)束，菌落還未完成一個完整周期的培養(yǎng)。

　　 三、水生細菌的計數(shù)

　　 1.血球板計數(shù)法

　　 取樣：先清洗一個容量為100毫升的取樣瓶或燒杯。取樣前輕輕振蕩試管攪拌，待分布均勻后，立即用注射器針管（無菌）取樣，取樣的量為1毫升。加蒸餾水100倍稀釋。

　　 樣品放于計數(shù)板：放置前必須將血球計數(shù)板和蓋玻片清洗干凈、擦干，不能有油污染和雜質(zhì)。將血球計數(shù)板平放在桌子上，蓋好蓋玻片；然后把樣品瓶輕輕搖動幾下，菌分布均勻，并立即用干凈的微吸管取樣品，迅速把微細吸管放到蓋玻片的邊緣處，輕壓微細吸管的橡皮帽，使樣品流入計數(shù)板內(nèi)。注意控制樣品流入量，不能過多，過多則流入到溝內(nèi)；也不能過少，過少則計數(shù)時不準(zhǔn)確（計數(shù)后的數(shù)量一般偏少），應(yīng)充滿畫線方格及其周邊部分。還應(yīng)注意蓋玻片下不能有氣泡存在，否則會造成計數(shù)不準(zhǔn)確。樣品吸入血球計數(shù)板后，稍停1分鐘，待細菌沉降在玻片表面上再在顯微鏡下進行計數(shù)。